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Biblioteca(s): | Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia.
Tipo da produção científica: | Orientação de Tese de Pós-Graduação
Data corrente: | 21/03/2011
Data da última atualização: | 21/03/2011
Autoria: | MENDONÇA, D. B. S.
Título: | Supressão da resposta do HIF-1alfa pelo NF-kB via competição pela ligação com o coativador transcricional p300.
Ano de publicação: | 2010
Fonte/Imprenta: | 2010
Páginas: | 122 p.
Descrição Física: | 1 CD-ROM.
Idioma: | Português
Notas: | Tese (Doutorado em Ciências Genômicas e Biotecnologia)- da Universidade Católica de Brasília. Orientador: Francisco José Lima Aragão, Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia. Co-orientador: Prof. Dr. Lyndon Frederick Cooper.
Conteúdo: | A hipóxia tem sido considerada um determinante chave do processo de osteogênese. O fator induzível por hipóxia 1a (HIF-1a) é um fator de transcrição mediador da resposta à hipóxia que leva à indução do fator de crescimento do endotélio vascular (VEGF) e também de fatores de crescimento relacionados ao tecido ósseo. Sinais inflamatórios antagonizam o reparo ósseo pela via do fator nuclear kappa B (NF-KB). O presente trabalho avaliou a relação funcional da hipóxia (função do HIF-1a) e a sinalização inflamatória (NF-KB) em linhagens de células indiferenciadas e osteoprogenitoras. A possível interação entre as vias do HIF-1a e NF-KB foi avaliada em estudos de co-transfecção com plasmídeos de expressão dos genes p65 e HIF-1a e plasmídeos repórteres 9x-HRE-luc ou genes alvos do HIF-1a em células hFOB. A interação dentro do núcleo foi testada utilizando o sistema two- hybrid de mamíferos com Ga14NP16, e posteriormente confirmada por ensaios de co-imunoprecipitação e westem blotting. Os resultados demonstraram que o estímulo inflamatório (tratamento com o fator de necrose tumoral - TNF-a) causou uma inibição significativa da função do HIF-1a no sítio de elementos responsivos à hipóxia (HRE) em células da linhagem osteoblástica. Células co-transfectadas com o vetor de expressão do p65 também apresentaram uma diminuição na atividade do promotor do gene hVEGF após indução da hipóxia com o agente mimético de hipóxia desferroxamina (DFO). Entretanto, o tratamento com TNF-a ou superexpressão do NF-KB através de plasmídeos ou vírus teve pouco efeito nos níveis de proteína ou mRNA e também não afetou a translocação do HIF- 1a para o núcleo da célula. A interação funcional das proteínas de fusão GaI4-HIF-1a e VP16- p300 foi bloqueada efetivamente pela expressão do p65 de uma maneira dose dependente. Conclui-se que a sinalização inflamatória mediada pelo NF-KB é capaz de bloquear a transativação do HIF-1a nos sítios HRE dos genes que respondem ao HIF-1 a através de uma competição direta pela ligação ao p300. A inflamação pode influenciar o nicho de células-tronco e a regeneração tecidual por interferir com a resposta das células à hipóxia.
Palavras-Chave: | Bone repair; HIF-1alfa; Hipóxia; Osteogênese.
Thesagro: | Inflamação.
Thesaurus Nal: | inflammation.
Categoria do assunto: | --
Registro original: | Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia (CENARGEN)
Exemplares: | CENARGEN - (33190-1) - UPA - TS - CD - 2011.004 - MEN - 2011.004 - DIS